Приложение на молекулярно-биологичен метод за идентифициране на Vibrio parahaemolyticus

Гергана Крумова-Вълчева, Ева Гюрова, Йордан Гогов

Резюме: Vibrio parahaemolyticus се изолира често от морски храни и има важна роля в етиологията на хранителните заболявания, протичащи с гастроентерит при хората. Значителна част от патогенните щамове продуцират термостабилен директен хемолизин (TDH) и TDH-свързан хемолизин (TRH), които са кодирани съответно от tdh- и trh-гени. В това проучване са изследвани 130 съмнителни за Vibrio parahaemolyticus изолати, получени от проби живи двучерупчести мекотели (M. galloprovincialis). Потвърждаването им е извършено с културални методи и полимеразно-верижна реакция (PCR). Културалните методи включват ISO 21872-1:2007 и биохимично потвърждаване с API 20E. PCR методът е приложен с амплифициране на видово-специфичният ToxR-ген и на tdh- и trh-гените за патогенност. От 130 изследвани изолати в 34 (33 %) и 12 (28 %) са регистрирани положителни резултати за V. parahaemolyticus, съответно чрез биохимични и молекулярно-биологични методи. От 12-те проби, положителни за ToxR- ген, нито една не е положителна по отношение на патогенните гени (tdh и trh). При сравнение с техниката на биохимичните тестове използваният PCR протокол е по-бърз и подходящ за рутинна лабораторна диагностика на V. parahaemolyticus в двучерупчестите мекотели.

Ключови думи: живи двучерупчести мекотели; PCR; Vibrio parahaemolyticus

Дата на публикуване: 2019-06-26